Kalibrering av termiske syklere er en viktig prosess for å ta vare på dem. Derfor må alle synspunkter være klare for å kalibrere ett av dem. Blant disse er molekylærbiologiske synspunkter, som fokuserer på å kopiere en PCR-reaksjon til synet til metrologer.
Derfor må kalibreringen utføres av kvalifisert personell, det vil si at ingen vanlig person kan prøve den. Husk at det gjennomføres års studier for dette. Synspunktene bør også gjennomføres under definerte miljøforhold som tillater prosessen, samt omstendighetene.
Kalibrering ved imitasjon av PCR-prosessen
Hvis vi tar det fra en molekylærbiologs perspektiv, er dette den beste måten å kalibrere enhver termosykler så lenge det er prosessen som etterligner PCR-prosessen. Den riktige prosessen er å legge tuvos i blokkbrønner, fylle reaksjonsblandingen og plassere sensorene. Fortsett deretter med å lukke rør og termiske syklere med det termiske dekselet for å utvikle PCR-protokollen som brukes i laboratoriet.
Hele denne prosessen må være under en reell temperatur i et rør fylt med en bestemt reaksjonsblanding. Alt dette må skje under PCR-protokollen utført fra et bestemt instrument.
Hver blandingskombinasjon hadde eller til protokollen og kalibreringsinstrumentet skulle gjentas. Dette gjør arbeidsmengden mye større. Det er derfor resultatene ikke engang kan sammenlignes mellom dem. Ikke engang til noen form for norm eller spesifikasjon etablert av produsenten.
Husk at denne måten å kalibrere på bokstavelig talt ville samle mange variabler ut av kontroll. Derfor er det å legge til en stor usikkerhetskomponent den beste måten å avslutte med usikkerheter som varierer i området mer enn 2 ° C. Nå, når usikkerheten er ca. 2 º C, og samtidig målingen på 96 º C , hender det at temperaturen til den termiske syklusen kan forekomme i et hvilket som helst område mellom 94 º C og 98 º C.
Det bør også tas i betraktning at temperaturforskjellen kan ha konsekvenser for inaktiveringen av Taq-polymerase. Derfor er usikkerhetsnivået slett ikke behagelig i kalibreringen av termosykleren. Men hvis PCR-prosessen kopieres kan det virke som et fristende alternativ.
Representativ prosesskalibrering
Fra et perspektiv er den beste måten å kalibrere et redskap som den termiske syklusen ved representativ og standard måling av PCR-prosessen. Metoden tillater kalibrering av all standard PCR. Dynamikken og dens statiske del må tas i betraktning under PCR-prosessen. Dette er viktig siden det er problemer som ikke kan kjennes med det blotte øye, eller rettere sagt med statisk kontroll av en PCR.
Temperaturer nær denaturering, forlengelse og hybridisering bør evalueres én etter én. Effektene de kan ha kan variere avhengig av temperaturen.
Kalibrering i henhold til internasjonale standarder
Hvis du jobber i meteorologiområdet, kan dette være det perfekte området for å kalibrere en termisk syklist. Når det gjelder meteorolog, er en kalibrering definert som nødvendige operasjoner under noen spesifikke forhold.
Under denne prosessen er sporbarhet garantert ved bruk av referansestandarder og uttrykk for verdier som er ansvarlige for kalibrering i SI-enheter. Men også på grunn av den usikkerheten beregnet fra kalibreringsresultatet. I tillegg til det faktum at de samme kalibreringene kun gjøres av ingeniører som er spesialiserte på kalibrering som bokstavelig talt er kompetente og kvalifiserte til å utføre en slik handling.
Hvordan vite om en kalibrering er helt trygg
- Kalibrering må måles med termiske egenskaper som inkluderer et PCR-resultat. Blant dem nøyaktigheten, overskuddet eller rekkevidden, den kjølige varmehastigheten, retensjonstid og jevnhet.
- En dynamisk prosess må gjennomføres i stedet for en statisk.
- Det er viktig å utføre gjennom flere kanaler for å utelukke tidseffekter mellom brønner.
- Det er svært viktig å ha kontrollerte miljøforhold.
- Autorisert personell må ha nødvendig erfaring for å utføre disse handlingene.
In Kalstein vi har termosyklere av høyeste teknologi og pålitelighet, som lar deg oppnå den beste PCR. Derfor inviterer vi deg til å ta en titt på HER
