Funksjonell elektroforese er en teknikk som består av proporsjonal migrering av molekyler gjennom en gel eller annen type porøs matrise, avhengig av deres molekylvekt eller størrelse; bevegelse generert av det elektriske feltet, dvs. vi tilfører en elektrisk strøm til molekyler enten det er biologisk, DNA, protein eller RNA, og de skilles ut etter om de er større eller mindre.
Generelt har de fleste biomolekyler en elektrisk ladning hvis størrelse avhenger av pH i mediet de finnes i; umiddelbart som et resultat, kan molekylene bevege seg når de utsettes for et elektrisk felt til ladningspolen motsatt den til molekylet. Avhengig av molekylet beveger det seg inn, ut, opp eller ned gelen.
Molekylær prosess utført av noen prøver for elektroforese.
- I proteiner: du tar vanligvis hele proteinet for å se hvor stort det er. Jo kortere, jo mer vandrer de inn i gelen, slik at de små proteinene havner i bunnen av gelen, fordi de har gått lenger, og de større vil ende opp med å holde seg på toppen.
- I DNA: Det er et veldig langt molekyl, så du kan ikke lage en gel av et helt DNA-molekyl fra en celle. Det er så stort at det aldri ville komme inn i gelen, så det forskerne gjør er å kutte DNAet med ting som restriksjonsenzymer, som kutter DNAet i mer håndterbare biter, og deretter migrerer disse bitene, avhengig av hvor store de er, mer eller mindre. gjennom gelen og havne høyere eller lavere.
- nukleinsyrer har kun en negativ ladning, på grunn av fosfatskjelettet. Derfor, i en elektroforese, vil nukleinsyrer migrere til den positive polen; det vil si anoden. Derfor er det en viktig del av den systematiske prosedyren for analyse (separasjon, rensing, forberedelse) av nukleinsyrer.
Elementer som er nødvendige for å utføre en elektroforese.
- Elektroforesekammer: er en boks som tillater generering av et elektrisk felt rundt en gel hvor prøvene er avsatt.
- Gel: medium støtte, kan være agarose eller polyakrylamid, akrylamid.
- Agarosegeler: det er et polysakkarid ekstrahert fra tang.
- Akrylamidgeler: syntetisk, termostabil, fargeløs og kjemisk inert polymer.
- Running Buffer: den gir midler for overføring av elektrisk strøm og opprettholder pH uendret mens strømmen kjøres.
- Molekylvektsmarkør: De er DNA- eller proteinmolekyler som gjør det mulig å bestemme størrelsen på nukleinsyre- eller proteinfragmenter i prøver utsatt for elektroforese ved sammenligning.
- Load Buffer: det er en buffer som tar sikte på å gi vekt, tetthet og farge til prøven, noe som letter avsetningen i brønnen og hindrer dens utgang fra gelen; det gjør det også mulig å overvåke flyten av prøven i gelen.
- Ultrafiolett transiluminator: enhet som sender lys fra det ultrafiolette spekteret gjennom prøven, spennende det kromogene molekylet som sender ut fluorescerende energi som tillater visualisering
Trinn som består av en typisk elektroforese.
- Forbered en gel av agarose eller akrylamid i den nødvendige konsentrasjonen.
- Bland prøvene som skal analyseres med en passende belastning buffer.
- Legg prøvene inn i gelen.
- Utfør den elektroforetiske kjøringen ved den aktuelle spenningen.
- Visualiser nukleinsyrene
I KALSTEIN tilbyr vi to linjer med elektroforese, en horisontal som du kan kjenne i følgende lenke HER og en vertikal HER begge har lignende egenskaper til merkevaren, som kvalitet, teknologi; har et bredt utvalg av tankstørrelser og -brett, samt mange kamalternativer, disse systemene kan håndtere alle slags elektroforeseeksperimenter.
Blant andre aspekter som tilsvarer spesiell prosesseringsteknologi, garanterer den effektivt varmespredning på en mer jevn måte, opprettholder en stabil pH under drift av elektroforese, blant andre funksjoner som du vil oppdage i vårt Kalstein Laboratory Equipment Company, med stor etterspørsel kjøp-salg over hele verden tilbyr vi deg online shoppingkanaler i følgende lenke HER
